Peptiden oplossen: reconstitutie stap voor stap

Bij reconstitutie los je een gevriesdroogd poeder op in een bekend volume oplosmiddel, zodat je een oplossing met een bekende concentratie krijgt. Gevriesdroogd is een peptide stabieler dan in oplossing; daarom los je een flacon pas op als je hem nodig hebt.

Welk oplosmiddel bij een materiaal past, staat op de productpagina, het datablad of het certificaat. Twijfel je, los dan eerst een klein deel op.

• Bac water: steriel water met 0,9% benzylalcohol als conserveermiddel. De gebruikelijke keuze als je een flacon over meerdere dagen gebruikt.
• Acetic acid water: steriel water met verdund azijnzuur. Voor peptiden met veel basische aminozuren die bij een neutrale pH slecht oplossen.
• Steriel water: zonder conserveermiddel. Geschikt als je de oplossing in één keer gebruikt, of als je materiaal geen benzylalcohol verdraagt.

• Werk schoon: handschoenen, een gedesinfecteerd werkvlak en een alcoholdoekje over de rubberen stop van beide flacons.
• Laat de flacon met poeder en het oplosmiddel op kamertemperatuur komen. Open je een koude flacon, dan slaat vocht uit de lucht neer op het poeder.
• Voeg het oplosmiddel steriel en langzaam toe langs de wand van de flacon, niet direct op het poeder.
• Zwenk of rol de flacon zachtjes tot alles is opgelost. Niet schudden: schuim kan peptiden beschadigen.
• Controleer de oplossing: ze hoort helder te zijn, zonder deeltjes of troebeling.
• Noteer op de flacon de datum, de concentratie, het oplosmiddel en het lotnummer.

De concentratie is de hoeveelheid peptide gedeeld door het volume oplosmiddel. Los je 10 mg op in 2 ml, dan is de concentratie 5 mg/ml, oftewel 5000 µg/ml. Meer oplosmiddel geeft een lagere concentratie, maar niet meer materiaal.

Met de peptidecalculator reken je dit snel uit, ook in µg/ml. Gebruik de netto hoeveelheid in mg zoals die op het etiket en het certificaat staat.

• Zet de oplossing direct in de koelkast (2–8 °C), op een plank binnenin en niet in de deur: daar schommelt de temperatuur bij elke keer openen.
• Vries een oplossing niet in: ijskristallen kunnen de peptidestructuur beschadigen.
• Een oplossing in bac water gebruik je binnen ongeveer 28 dagen. Een oplossing in steriel water zonder conserveermiddel gebruik je in één keer.
• Bewaar de flacon rechtop en beschermd tegen licht. Wordt de oplossing troebel of geel, of zie je deeltjes? Gebruik haar dan niet meer.

• Schudden in plaats van zwenken, waardoor schuim ontstaat.
• Het oplosmiddel direct op het poeder richten in plaats van het langs de wand te laten lopen.
• Een koude flacon openen, zodat er vocht in komt.
• Een opgeloste flacon invriezen.
• Een flacon met steriel water zonder conserveermiddel over meerdere dagen gebruiken.

Hoe lang duurt het oplossen?

Meestal is het poeder na enkele minuten zachtjes zwenken opgelost. Blijft er iets achter, laat de flacon dan even staan en zwenk opnieuw. Lost het dan nog niet op, kijk dan op het datablad of een ander oplosmiddel past.

Er staat schuim op de oplossing. Wat nu?

Laat de flacon rechtop in de koelkast staan tot het schuim is verdwenen, en zwenk voortaan in plaats van te schudden.

Mag een opgeloste flacon in de vriezer?

Nee. IJskristallen kunnen de peptidestructuur beschadigen. Bewaar een oplossing in de koelkast (2–8 °C).

Bac water of acetic acid water?

Voor de meeste peptiden bac water. Acetic acid water is voor peptiden die bij een neutrale pH slecht oplossen; het datablad of het certificaat geeft aan welk oplosmiddel past.

• Bekijk Bac water in de shop
• Bekijk Acetic acid water in de shop